如何通过染色体检查确诊超雄？

超雄综合症是由于有害化学物质、X线照射、环境因素影响、高龄妊娠、近亲配婚等，导致妊娠时染色体的数目、形态、结构及结合上发生变异所引起的疾病。羊水细胞的染色体检查，对于超雄综合症的产前诊断具有很大的特异性意义。

羊水细胞培养染色体检查测定原理，羊水细胞是胎儿皮肤、消化道、呼吸道和经生殖泌尿系统脱落的细胞，95％左右是死细胞，因此必须经过细胞培养，使活的细胞得到充分的增殖，才能收获细胞，进行核型分析。

操作方法如下：

1、取孕期16～20周羊水15～30ml，1000r/ml离心10min。

2、弃去多余上清液，留1ml羊水和沉淀细胞，轻轻打散成细胞悬液。

3、养基3ml及小牛血清1ml，置37℃温箱中培养。

4、培养7～10天后可见大量成纤维样或上皮样细胞集落。此时可调换新鲜培养液。

5、待细胞集落扩大成片，并有许多透亮的圆形分裂细胞时，即可加入秋水仙素，使最终浓度为0.1～0.3μg/ml，置37℃温箱中再培养5～6h上述过程均在无菌条件下进行。收获标准：①以成纤维细胞为主要类型，成片细胞生长;②以10倍目镜和20倍物镜观察，生长的细胞克隆覆盖1个或1个以上完整视野;③见到10个以上透亮的圆形细胞和10个以上双圆形光亮的分裂细胞。

6、如果细胞生长不旺盛，生长周期不齐或细胞老化，未达收获标准，可在原瓶继续传代培养。方法：在无菌条件下先倒去培养液，加入2.5g/L无菌胰蛋白酶液数滴，摇动后倒去。再加入胰蛋白酶5～10滴，在37℃下轻轻摇动约5min，使贴壁细胞脱落。加入含小牛血清的新鲜培养基4ml，在37℃静置培养4～5h。再小心更换培养液，继续培养，一般传代后3～5天即可收获。

7、将培养液移至刻度离心管中，加ED-TA-胰蛋白酶液1ml于培养瓶内，置37℃温箱中5min，然后用弯头吸管冲洗贴壁细胞也可用2.5g/L胰蛋白酶溶液消化。将脱离瓶壁的细胞倒入离心管中，与原培养液相混合，并用少量温热生理盐水冲洗培养瓶，洗下的细胞也一并倒入该离心管，以1000r/min离心10min。

8、吸弃上清液，加入预温37℃的0.075mol/LKCl低渗液3～5ml，置37℃10～15min。

9、预固定、固定及制片均与外周血细胞染色体标本的制备法相同。

正常情况下染色体总数为46条;其中常染色体22对序号为1～22;性染色体男性为XY，女性为XX;男性核型46，XY;女性核型46，XX。染色体检查适用于各种染色体数量异常：如唐氏综合征21三体综合征、18三体综合征、13三体综合征、8三体综合征、22三体综合征、先天性睾丸发育不全综合征、XXY综合征、特纳综合征、X三体和多X体综合征等。