血清在-20℃以下通常可保存1-2年,实际保存时间受分装方式、反复冻融次数、初始质量、添加剂类型、密封条件等因素影响。
小体积分装能显著延长保存期限。单次使用量分装如1ml/管可避免反复冻融导致的蛋白变性,保存时间可达2年;大体积分装如50ml/瓶解冻后未用完部分再次冷冻会加速有效成分降解,保存期限缩短至6-12个月。
每增加一次冻融循环会使活性成分损失5%-15%。理想情况应严格避免冻融超过3次,超过5次冻融的血清建议降级用于非关键实验。冻融过程中冰晶形成会破坏细胞因子和生长因子结构。
采集时血红蛋白含量超过20mg/dl的溶血血清,保存期限缩短30%-50%。经0.1μm三级过滤的胎牛血清比普通新生牛血清稳定性更高,-20℃下IgG抗体效价可维持24个月无明显下降。
添加5%-10%甘油可降低冰点,减少冰晶损伤,使保存期延长至3年。含EDTA抗凝剂的血清比肝素处理血清更耐储存,但可能干扰钙依赖性实验。γ射线辐照灭菌血清比过滤除菌血清稳定性差。
使用螺纹口冻存管配合硅胶垫圈密封,相比普通EP管能减少水分升华,保存18个月后体积损失不超过5%。真空包装血清在-20℃下关键生长因子活性保持率比普通包装高40%。
长期保存建议每管标注冻存日期和冻融次数,使用前室温缓慢解冻并轻柔混匀。定期抽样检测pH值正常范围7.0-8.0、渗透压280-340mOsm/kg及无菌状态。出现沉淀物时可经0.22μm滤膜过滤后使用,若沉淀物呈絮状或变色应停止使用。运输过程需保持干冰环境,避免温度波动导致蛋白聚合。科研用血清建议-80℃超低温保存,临床检验用血清需遵循CLSI标准进行稳定性验证。
2025-01-05
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