黄体功能不全可通过血清孕酮检测、超声检查、基础体温测定、子宫内膜活检和尿孕二醇测定等方式诊断，通常由黄体期缩短、孕激素分泌不足、卵泡发育不良、高催乳素血症或子宫内膜容受性下降等因素引起。
月经周期第21天左右抽取静脉血检测孕酮水平，若低于10纳克每毫升可能提示黄体功能不全。该检查需结合临床症状与其他检测综合判断，避免单一数值误诊。孕酮水平不足可能导致月经周期紊乱或不孕，需配合医生进一步排查多囊卵巢综合征等潜在病因。
经阴道超声动态监测卵泡发育及黄体形成情况，观察黄体体积、血流信号及是否存在过早萎缩。黄体期卵泡未破裂黄素化或黄体直径过小均为典型表现，可辅助诊断黄体功能异常。检查建议在月经周期特定时间重复进行以提高准确性。
每日晨起静息状态下测量基础体温并绘制曲线，正常黄体期体温应上升0.3-0.5摄氏度并持续12-14天。若高温相短于10天或温差不足0.3摄氏度，需警惕黄体功能不足。该方法成本低但易受睡眠、感染等因素干扰，需连续监测3个月经周期。
月经来潮前1-3天取少量子宫内膜组织病理检查，若发现分泌期延迟或发育不良，提示孕激素作用不足。该检查为有创操作但结果直观，可评估子宫内膜对孕激素的反应性，适用于反复流产或试管移植失败患者的病因筛查。
收集24小时尿液检测孕二醇代谢物浓度，间接反映孕激素分泌水平。该方法适用于动态监测黄体功能变化，但需排除肝肾代谢异常对结果的干扰。若多次检测数值低于正常范围，可能需补充黄体酮等替代治疗。
确诊黄体功能不全后，建议保持规律作息，避免过度节食或剧烈运动。日常可适量增加坚果、深海鱼等富含维生素E和Omega-3脂肪酸的食物，有助于改善卵巢功能。若计划妊娠，需在医生指导下进行孕激素补充治疗，并定期复查超声及激素水平。月经周期异常持续3个月以上或合并不孕时，应及时到生殖医学科或妇科内分泌专科就诊。
