纤维蛋白原溶解后建议在2-8℃冷藏条件下保存不超过24小时。实际保存时间受溶解方法、保存温度、抗凝剂类型、样本初始浓度及微生物污染风险等因素影响。
机械震荡溶解与酶解法对纤维蛋白原结构影响不同。超声破碎可能导致蛋白构象改变,37℃水浴酶解更利于维持稳定性。溶解后需立即分装以减少反复冻融造成的降解。
4℃冷藏可延缓纤维蛋白原聚合反应,但超过24小时可能出现自发交联。-20℃冷冻保存可延长至72小时,但复溶时需37℃缓慢回温避免蛋白变性。
枸橼酸钠抗凝样本稳定性优于肝素抗凝。肝素可能激活血小板释放纤溶酶原激活物,加速纤维蛋白原降解。EDTA抗凝会螯合钙离子影响后续功能实验。
高浓度纤维蛋白原溶液更易形成微凝块。建议调整浓度至2-4mg/ml,过低浓度会增加蛋白吸附损耗。分装体积不超过1ml可减少冻融次数。
溶解操作需在生物安全柜中进行。添加0.1%叠氮钠可抑制细菌生长,但可能干扰部分检测项目。出现絮状沉淀或溶液浑浊应立即废弃。
长期保存应置于-80℃并添加冻存保护剂。使用前需检测凝固时间及纤维蛋白聚合能力。避免与纤溶酶抑制剂共同存放,定期校准凝血分析仪。实验室内需建立样本周转时间监控系统,临床检测样本建议4小时内完成分析。运输过程需保持冷链并使用专用防震容器,温度波动超过2℃需重新评估样本有效性。
2011-07-28
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